crispr-cas9原理(crispr amp 47 cas9的原理)

导读 大家好,小跳来为大家解答以上的问题。crispr-cas9原理,crispr amp 47 cas9的原理这个很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!1、此
2024-03-01 05:30:07

大家好,小跳来为大家解答以上的问题。crispr-cas9原理,crispr amp 47 cas9的原理这个很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!

1、此系统的工作原理是 crRNA( CRISPR-derived RNA )通过碱基配对与 tracrRNA (trans-activating RNA )结合形成 tracrRNA/crRNA 复合物,此复合物引导核酸酶 Cas9 蛋白在与 crRNA 配对的序列靶位点剪切双链 DNA。

2、而通过人工设计这两种 RNA,可以改造形成具有引导作用的sgRNA (singleguide RNA ),足以引导 Cas9 对 DNA 的定点切割。

3、 作为一种 RNA 导向的 dsDNA 结合蛋白,Cas9 效应物核酸酶是已知的第一个统一因子(unifying factor),能够共定位 RNA、DNA 和蛋白,从而拥有巨大的改造潜力。

4、将蛋白与无核酸酶的 Cas9( Cas9 nuclease-null)融合,并表达适当的 sgRNA ,可靶定任何 dsDNA 序列,而 sgRNA 的末端可连接到目标DNA,不影响 Cas9 的结合。

5、因此,Cas9 能在任何 dsDNA 序列处带来任何融合蛋白及 RNA,这为生物体的研究和改造带来巨大潜力。

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